摘要：目的基于药性理论，通过对临床医保目录中抗白癜风中成药方药活性成分的筛选，对其有效成分进行初步药效学评价及机制探讨。方法收集抗白癜风中成药组方、药性和物质基础以筛选主药。通过TCMSP和TCMIP数据库得到主要化合物类型。使用admetSAR分析成药性得出关键化合物。通过成年斑马鱼和斑马鱼幼鱼的形态学、黑色素含量测定观察体内药效学。通过斑马鱼幼鱼存活率进行安全性评价。通过RT-PCR显示化合物在转录水平中的作用机制。使用分子对接预测化合物与蛋白晶体结构的结合能力。结果使用频次最高的主药为红花、紫草、蒺藜、龙胆、补骨脂和驱虫斑鸠菊。通过TCMSP和TCMIP数据库得到主要化合物类型为黄酮类，共有81个。根据成药性和稳定性筛选出甲氧基黄酮类化合物山柰素和异鼠李素。32μmol/L山柰素、32μmol/L异鼠李素和25μmol/L甲氧沙林均能促进斑马鱼黑色素再生。基于斑马鱼胚胎模型，3个化合物均能加速胚胎黑色素生成，且其有效浓度下斑马鱼幼鱼的存活率在90%以上。RT-PCR结果显示山柰素与异鼠李素上调黑色素生成关键基因黑素皮质素1受体（MCIR）和小眼畸形相关转录因子（MITF）mRNA水平。分子对接结果显示山柰素、异鼠李素与底物酶结合分数高于甲氧沙林。结论临床抗白癜风中成药组方中活性成分山柰素与异鼠李素促进斑马鱼模型黑色素生成且通过上调MC1R/MITF信号通路作用。
白癜风是一种慢性色素脱失性疾病，直接病因是黑色素细胞酪氨酸酶活性的降低或消失[1]。中医治疗白癜风有着悠久的历史，中医理论中白癜风是由于肝气郁结，气机不畅，复受风湿相搏于皮肤，致气血阴阳不和，日久而伤脾。肝亏肾虚，加之肝脾不和，致皮毛腠理失养[2-3]。维吾尔医学认为白癜风是由于黏液质的异常所致，其在性质上含有过度湿和过度寒，损害胃肠等脏器的正常生理功能，导致异常体液生成，由此形成恶性循环[4]。中医治疗白癜风多采用扶正祛邪的治疗原则，多用性温平，味甘、苦、辛的药材[5]；而维医治疗白癜风主张清除异常的黏液质，多用性温热，味辛、苦的药材[6]，临床抗白癜风医保目录方药信息见表1。本文基于临床一线抗白癜风中成药的指导，从药性阴阳理论出发，寻找方药中促进黑色素生成的活性成分并探讨其机制。
1材料
1.1实验动物
TU系斑马鱼（成年斑马鱼及斑马鱼幼鱼各条）购自南京尧顺禹生物科技有限公司。饲养条件为光照14h黑暗10h，水温（28.5±0.1）℃[7]。
1.2试剂
山柰素（质量分数≥98%，批号R23N8F）、异鼠李素（质量分数≥98%，批号P09O8F）、甲氧沙林（质量分数≥98%，批号P30J7M）均购自上海源叶生物科技有限公司；西班牙琼脂糖AgaroseG-10（批号）购自天津沃德生物科技有限公司；DMSO（质量分数≥99.9%，批号C）购自北京索莱宝科技有限公司；新铜试剂（质量分数≥98%，批号BCBT）购买自上海西格玛奥德里奇贸易有限公司；甲苯胺蓝（批号DB22BA）、UNlQ-10柱式Trizol总RNA抽提试剂盒（批号EA16KA）均购自上海生工生物工程股份有限公司；2×TaqPCRMix（批号R）购自北京天根生化科技有限公司；ThermoScientificRevertAidFirstStrandcDNASynthesisKit（批号）购自ThermoFisherScientific。引物购自上海生工生物工程股份有限公司，引物序列见表2。
2方法
2.1临床医保目录中抗白癜风中成药的收集
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